科研工作中，因?qū)嶒炠Y源配置、實驗流程設(shè)計所限，修改實驗操作方法是常事。譬如參考文獻中用的是Optima XPN-100立式超速離心機SW 40 Ti（6×14mL/40000rpm）或SW 60 Ti (6×4mL/60000rpm)水平轉(zhuǎn)頭梯度密度離心3小時，而現(xiàn)實條件下實驗者可用的卻是Optima XE-90超速離心機和SW 32 Ti (6×338.5mL/32000rpm)、Type 70 Ti (8×39mL/70000rpm)或Type 90 Ti (8×13.5mL/90000rpm)此類轉(zhuǎn)頭配置。若想最大程度重現(xiàn)文獻報道中的分離效果，可能就涉及如何用角轉(zhuǎn)頭來離心前人所用的4-38.5mL開口超速離心管的問題。

       實驗者固然可以通過重新訂購Quick-Seal熱封管、OptiSeal指封管來解決難題，但正如我們在《開口超速離心管的選擇及使用方法說明》篇中討論的那樣，其實也完全可以用為4.0mL 超凈Ultra-Clear開口管(344062)、14.0mL Ultra-Clear超凈開口管（344060）等開口管添加密封蓋的方法來擺脫困境。

       超速離心開口管加蓋通常用的有兩種方法。

       一種是經(jīng)典的管蓋組件-管固定鉗-扳手方法。此方法中管蓋組件（Tube Cap Assembly）、管鉗（Tube Cap Vise）、六角扳手（hex wrench）和專用螺絲刀（Tube setter）缺一不可，操作流程較為繁瑣，對實驗者的使用經(jīng)驗及熟練程度有一定要求。

       另一種方法是Himac開發(fā)的S-Cap密封法。該方法操作相對簡便，只需將結(jié)構(gòu)相對簡單的配套管蓋組件用專門的壓蓋器固定于開口管管口即可，不容易出現(xiàn)操作紕漏，處置效率高。

       本文僅對S-Cap密封法的應(yīng)用及操作方法作一簡單介紹。

1、超速離心開口管S-Cap密封法適用對象

       Himac開發(fā)的S-cap套件由不銹鋼定位螺釘（Setscrew）、鋁質(zhì)閥桿（aluminum）和鈦質(zhì)緊箍環(huán)（Ti Ring）三個組件組成，可為12mL、40mL薄壁開口管提供簡單易行的加蓋密封操作，提高開口管在更高轉(zhuǎn)速下離心的可靠性和可操作性。

       S-cap套件具有無O型圈等易損件，易清潔，可高溫高壓滅菌或化學方法消毒處理，可反復使用的特點。適用于12PA/12PE/40PA/40PE管使用，加蓋后開口管可用于CP100NX立式超速離心機所屬?P90AT (8×12mL/90000rpm)、P80AT (8×12mL/80000rpm)、P70AT2 (12×12mL/70000rpm)、P70AT (8×40mL/70000rpm)、P50AT2 (12×40mL/50000rpm)角轉(zhuǎn)頭中離心。                                             

2、S-Cap密封法所需材料與工具

       S-Cap密封操作需要用到薄壁開口管、相應(yīng)S- Cap套件和操作工具套件（S-Cap Tool Set）。

2.1 S-Cap套件

       S- Cap套件中核心是特殊設(shè)計的閥桿。其下半部為圓管形，類似于離心瓶內(nèi)蓋，可插入管口為管壁提供剛性支撐。閥桿上部為同心環(huán)設(shè)計，內(nèi)外環(huán)之間為一環(huán)形溝槽（槽直徑與管蓋提取器的較粗一端匹配）。內(nèi)環(huán)圓心處設(shè)置一螺紋孔，用于安裝螺釘和插入管蓋提取器的螺紋桿。

閥桿安裝就位后，再用箍環(huán)套在離心管口外部，用于將管壁與閥桿箍筋，讓二者緊密接觸。箍環(huán)不僅消除了二者間的氣泡、縫隙，防止液體進入連接部，最關(guān)鍵的是利用二者間的靜摩擦力可將管和閥桿牢牢固定。

       由于閥桿外壁直徑對管口內(nèi)經(jīng)，而箍環(huán)內(nèi)徑對離心管外徑。故閥桿、箍環(huán)須成對配套購買和使用。

       螺釘為S-Cap通用件，上部膨大，適用于六邊形扳手操作。下部為細長螺紋桿，可旋入閥桿中心的螺紋孔。移液加樣和回收樣品時，需卸下螺釘以開放液體進出通道，方便注射器針頭通過此通道向管內(nèi)移液或吸取樣品。離心管加樣和配平完成后，需將螺釘重新裝回閥桿中心孔以密封離心管。

2.2 加蓋工具套件

       工具套件（S-Cap Tool Set）包括管蓋提取器(Tube Setter)、手動壓蓋器(Hand Press)和管架(Tube Holder)三部分。

       管蓋提取器中間有手柄、兩端外形粗、細不同。較粗一端為圓筒、筒中心為突出的螺紋立柱，可插入S-Cap蓋內(nèi)環(huán)正中的螺紋孔，用于離心結(jié)束后提取出閥桿。細棒狀一端為六邊形扳手，用于旋動S-Cap蓋上的帶六邊形螺帽的定位螺釘。

       壓蓋器的工作頭升降由手工控制。用于將S-Cap蓋壓入管內(nèi)及離心管外部安裝箍環(huán)。

       管架分管架C(12mL管專用)、管架D(30mL管專用) 、管架E(40 mL管專用)三種規(guī)格，管架C須裝入管架E中組合使用。操作時，將離心管安裝于管架中，管架轉(zhuǎn)移到壓蓋器底座上專用卡位后，則可確保離心管剛好位于工作頭的正下方。

       Himac離心機為用戶提供了三種套件和多種工作套裝，方便實驗者根據(jù)所用轉(zhuǎn)頭、離心管數(shù)量選配使用詳見“S-Cap密封蓋及工具套件”。

3、S-Cap密封法操作步驟

       開口管S-Cap蓋組裝密封操作過程是：去除S-Cap蓋螺釘——樣品裝填——安裝閥桿——安裝箍環(huán)——離心管補充加樣、重量配平——S-Cap蓋螺釘密封。而管蓋解封操作過程則是取下固定螺釘——手動向下取下箍環(huán)——取下閥桿。

       下面是蓋密封和解封具體操作步驟。

3.1 物料準備和檢查

       1）檢查離心管結(jié)構(gòu)外觀，根據(jù)離心管規(guī)格選擇S-Cap蓋組件；

       2）準備好S-Cap工具組件和管架；

3.2 安裝閥桿

       3）使用管蓋提起器的粗筒端六角扳手從閥桿上拆下固定螺釘；

       4）將樣品填充到離心管容量的75%處（余下空間待箍環(huán)安裝完成、離心管配平步驟中繼續(xù)裝填）；

       5）將閥桿插入到管口；

       6）將離心管裝入配套管架中；

       7）將管架安裝與壓蓋器專用卡座后，向下壓壓蓋器手柄，將閥桿安裝就位；

3.3 安裝箍換

       8）從管架上取下帶閥桿的離心管，確認箍環(huán)的凹槽在下，將箍環(huán)從管底部套入、向上滑動到管的上部；

       9） 將離心管重新安裝到管架內(nèi)；

       10）將管架放在壓蓋器卡座后下壓手柄，直到箍環(huán)上部與閥桿有效接觸；

3.4 離心管配平

       11）從壓蓋器上移除管架，用注射器取樣繼續(xù)填充離心管，以防管上部空閑體積過大在運行過程中發(fā)生變形；

       12）同時將離心管、固定螺釘放入天平中，將對稱布置的任意兩根離心管總重量差值保持在0.3g以內(nèi)；

       13）擰緊固定螺釘完成管蓋密封。

3.5 離心后管蓋拆卸程序

       14）取下固定螺釘，用注射器從閥桿的中心孔中取出20%的上清液；

       15）一只手握持離心管，另一只手向下褪去箍環(huán)；

       16）將管蓋提取器插入閥桿中心孔中，然后緩慢拉起閥桿后移去閥桿。

主要參考文獻：

1. Rotors, Tubes, Bottles And Caps Instruction Manual For Ultracentrifuge (S99920421)