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操作規(guī)程
ABI Veriti 梯度PCR儀基本操作規(guī)程
1. 打開PCR儀熱蓋,插入0.2ml的樣品管,蓋好熱蓋。
2. 打開PCR儀電源,儀器程序開始初始化,需等待幾分鐘;初始化完成后,顯示主菜單。
3. 點“Browse/New Methods”,進入PCR程序列表。
4.可直接點一個PCR程序,選擇“Start Run”運行;點右邊的符號,可選擇不同的文件夾。
5. 若要新建一個PCR程序,點“New”,出現(xiàn)PCR程序:
1)添加一段程序:點中上方的“Stage”位置,該位置變紅;再點“Add”,將加入一段新的程序。2)修改循環(huán)次數(shù)、溫度、時間:點中循環(huán)次數(shù)、溫度或時間位置,下方出現(xiàn)數(shù)字鍵。依次點數(shù)字鍵,出現(xiàn)合適數(shù)字后,點“Done”確定。
3)添加一個步驟:點“Step”位置,該位置變紅;再點“Add”,軟件將加入一個新的步驟。
4)刪除一個步驟:點“Step”位置,再點“Delete”,軟件將該步驟刪除。
5)建立梯度模式:
a)點中一個步驟,再點“Option”鍵。
b)點“VeriFlex step”,出現(xiàn)梯度創(chuàng)建窗口:輸入6個梯度溫度,溫度下方的“1-2”是指對應的1、2兩行加熱孔,全部輸好后,點“Done”確定(注意:相鄰的兩個梯度溫度之差最大不能超過5℃)。
6)編輯PCR程序完成后,點“Save”保存。
7)點“Run Method”,輸入PCR程序名稱;點,選擇保存PCR程序的文件夾(若要保存在USB中,需先插U盤),再輸入反應體積和熱蓋溫度(這兩項在運行程序時可以修改)。點“SaveδExit”確定。
6. 回到PCR程序列表界面,選擇新建的PCR程序,點“Start Run”出現(xiàn)運行參數(shù)設(shè)置窗口:輸入反應體積和熱蓋溫度,點“Start Run Now”開始運行。
7. 儀器運行選中的PCR程序,顯示運行監(jiān)視窗口。
8. 暫停運行:點“Pause Run”,儀器暫停,出現(xiàn)暫停選項欄:“Remaining Time”顯示暫停剩余時間,“ Elapse Time”顯示已暫停時間。若要修改暫停時間,點,輸入時間值,點“Done”確定;點“Resume Run”結(jié)束暫停,繼續(xù)運行PCR程序。
9. 終止運行:點“Stop”可以終止整個PCR程序。
10. 反應報告:PCR程序結(jié)束后,自動生成反應報告(可保存和打?。@示當次反應的各項指數(shù)。
11. PCR反應結(jié)束后,打開熱蓋,取出樣品,關(guān)閉儀器電源。將儀器開蓋放置,待熱蓋和加熱模塊降至室溫后關(guān)上蓋子。