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莫愁前路無知己 天下誰人不識(shí)君——Implen NanoPhotometer微量紫外可見光度計(jì)隆重上線
2003年,當(dāng)美國(guó)NanoDrop Technologies Inc.公司首款微量紫外可見分光光度計(jì)NanoDrop 1000成功上市時(shí),德國(guó)人馬丁·薩希里(Martin Sahiri)和托馬斯·薩希里(Dr. Thomas Sahiri)在德國(guó)著名的生物工程學(xué)技術(shù)、軟件服務(wù)中心慕尼黑創(chuàng)辦了Implen。3年后,具有超低體積液體樣品分析功能的第一代NanoPhotometer微量紫外可見分光光度計(jì)(NanoPhotometer microvolume UV/Vis spectrophotometer)研發(fā)成功。
如今,Implen NanoPhotometer系列微量紫外可見光度計(jì)已被全球最負(fù)盛名的生物技術(shù)公司、化學(xué)和制藥公司及研究機(jī)構(gòu)引入,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)被數(shù)千份科學(xué)出版物引用。PubMed數(shù)據(jù)查詢結(jié)果顯示,2006.01 - 2022.05期間,采用了NanoPhotometer測(cè)試結(jié)果、可公開查詢到原文的論文數(shù)量達(dá)3363篇。其中,包括了Nat Commun 50篇(2015-2022),Nucleic Acids Res 24篇(2014-2022),Nature 3篇(2013/2017/2021),Plant Cell 7篇(2010-2022),Proc Natl Acad Sci USA 12篇(2011-2022),Sci Adv 12篇(2017-2022),Mol Cell 2篇(2020),Nat Chem Biol 2篇(2017)。此外,還有Nat Genet(2013),Nat Med(2018),Nat Microbiol(2019),Nat Neurosci(2013),Nat Protoc(2019)、Nat Struct Mol Biol(2018)各1篇。
在NanoDrop品牌影響力如日中天、市場(chǎng)占有率均絕對(duì)領(lǐng)先(發(fā)文數(shù)量超過4.1萬)的背景下,NanoPhotometrer能生根發(fā)芽、并逆襲成長(zhǎng)為如今體量,實(shí)屬不易。那Implen公司到底有何核心專利技術(shù)還能打動(dòng)人心?
這項(xiàng)炫酷的技術(shù)就是樣品壓縮技術(shù)(Sample Compression Technology?)。
如圖所示,所謂的樣品壓縮,即在上、下兩個(gè)石英玻璃表面之間,對(duì)微小液滴擠壓,把液珠由初始的小圓珠變成圓餅、薄膜。從樣品基座中射出的測(cè)試光束穿透液體層到達(dá)頂蓋,被石英鏡面反射,原路折返而再次穿過液體層、底座光學(xué)窗口,并最終傳導(dǎo)至信號(hào)檢測(cè)器而完成樣品的檢測(cè)。其測(cè)試光路的長(zhǎng)度(Path Lengths, 光程)等于上、下兩個(gè)石英界面距離的2倍。
Implen的十二道微量紫外可見光度計(jì)NanoPhotometer N120工作時(shí),2 μL液滴可被壓縮到0.0625 mm的厚度(0.125mm測(cè)試光程模式),而NanoPhotometer NP80、N60和N50 三款機(jī)型的NanoVolume測(cè)定時(shí),可將0.3 μL樣品液壓薄至0.035 mm(0.07mm測(cè)試光程模式)。
要保證NanoPhotometer測(cè)試精準(zhǔn),光程的準(zhǔn)確控制是關(guān)鍵。
NanoPhotometer采用的是電磁驅(qū)動(dòng)的固定錨點(diǎn)定位技術(shù)(True Path Technology?)。檢測(cè)基座工作時(shí)只能在限定的2個(gè)固定位置???,而別無其他??奎c(diǎn)可以停泊。這樣確?;c反射鏡面間的工作距離只能是儀器的兩個(gè)預(yù)設(shè)值之一,防止因機(jī)械驅(qū)動(dòng)誤差所致的間距偏差和漂移。
Implen NanoPhotometer NP80與NanoDrop One C光程和測(cè)試性能對(duì)比
型號(hào) | Implen NanoPhotometer NP80 | NanoDrop One C | |
微量測(cè)試模塊 | 測(cè)試上樣體積 | 0.3 - 2 μL | 1.0 - 2 μL |
樣品測(cè)試時(shí)長(zhǎng) | 5 secs | 8 secs | |
最長(zhǎng)測(cè)試光程 | 0.67 mm | 1.0 mm | |
最短測(cè)試光程 | 0.07 mm | 0.03 mm | |
樣品濃度范圍 | dsDNA: 1 - 16500 ng/μL BSA: 0.03 - 478 mg/mL | dsDNA: 2.0 - 27500 ng/μL BSA: 0.06 - 820 mg/mL | |
測(cè)試準(zhǔn)確度 | < 1.75% @0.7A (280nm) | 3% at 0.97A (302 nm) | |
測(cè)試重復(fù)性 | CV< 1% @0.3 -1.7A (280 nm) | CV< 1%@0.002A (1.0mm path) | |
比色皿模塊 | 測(cè)試濃度范圍 | dsDNA:0.1 - 130 ng/μL BSA:0.003 - 3.7 mg/mL | dsDNA:0.20 - 75 ng/μL BSA:0.13 - 49.5 ng/μL |
測(cè)定范圍 | 0 - 2.6 A | 0 - 1.5 A | |
控溫范圍 | 37 ± 0.5℃ | 37℃ |
對(duì)比顯示:在最長(zhǎng)光程模式下,NanoPhotometer NP80測(cè)定樣品濃度的下限指標(biāo)優(yōu)于NanoDrop One C;而在最短光程模式下,NanoDrop One C光程更短,因此可測(cè)定的樣品濃度的上限要高于NanoPhotometer NP80的測(cè)定極限。
這兩套系統(tǒng)的測(cè)試過程都具有光程自動(dòng)調(diào)節(jié)功能。NanoDrop One C為0.03mm/0.05mm/0.1mm/0.2mm/01mm五檔光程自動(dòng)掃描測(cè)定,而NanoPhotometer NP80為0.67mm/0.07mm雙光程掃描檢測(cè),因此,單個(gè)樣品測(cè)試處理時(shí)間,NanoDrop One C要比NanoPhotometer NP80長(zhǎng)3秒鐘。
NanoDrop在最長(zhǎng)光程模式下測(cè)定時(shí),需借助于液體自身足夠的表面張力強(qiáng)度,以確保樣品液柱形態(tài)保持穩(wěn)定和測(cè)試數(shù)據(jù)的有效性。而經(jīng)脫鹽純化處理后的蛋白溶液、非極性溶劑、SDS等去污劑殘留或樣品溫度升高等,均可導(dǎo)致液體表面張力的降低,故可能會(huì)影響到樣品測(cè)試的準(zhǔn)確性。
此外,為維持檢測(cè)基座的疏水性能,NanoDrop官方操作規(guī)程要求定期采用PR-1基座表面修復(fù)試劑盒對(duì)基座進(jìn)行表面修復(fù)。而NanoPhotometer NP80的測(cè)定過程無需液體表面張力參與光程的控制,也就無須對(duì)石英基座表面疏水狀態(tài)進(jìn)行維護(hù)的必要性。因此,NanoPhotometer NP80的使用維護(hù)管理要更輕松。